温州细胞高效转染试剂价格(m6A甲基化修饰试剂盒如何根据样本类型来挑选)
温州细胞高效转染试剂价格(m6A甲基化修饰试剂盒如何根据样本类型来挑选)病毒RAN快速提取试剂盒总RNA提取试剂盒(P-9107)首先,提取病毒RNAm6A RNA的形成是由多蛋白质甲基转移酶复合物调控的,部分由METTL酶调控。最近的研究发现,在哺乳动物中存在这些甲基化酶“写入者”及其相关的去甲基酶“擦除者”,揭示出 RNA m6A甲基化修饰是可逆的,如下图所示。 一个甲基通过METTL3 / 14异二聚体以化学方法加入到腺苷(A)残基的氮6位上,形成了N6-甲基腺苷(m6A)。 然后,m6A可以通过FTO介导的氧化脱甲基作用,逐步转化为N6-羟甲基腺苷(hm6A),随后转化为N6-甲酰腺苷(f6A),最后最终还原为原始腺苷酸(A)。m6A修饰对RNA病毒生命周期的影响病毒RNA修饰的研究工作流程有哪些呢?
如果新冠病毒SARS-CoV-2的大流行对我们有任何启发的话,那么要数对RNA修饰的研究了,此时研究病毒RNA以及其甲基化修饰等功能,显得比以往任何时候都更加重要。 而这是否意味着要研究病毒RNA本身不同的各种突变体或者表观遗传变化如何使这些病毒更灵活和感染力?还是研究从细胞和组织中收集的RNA是怎么对宿主细胞功能的产生影响和致病的?然后,现实告诉我们,这项研究工作几乎是无止境的。
通常,设置实验中最具挑战性的部分之一是每一步实验操作的处理方式。
首先我们了解一下研究背景:
m6A RNA甲基化和去甲基化循环
m6A RNA的形成是由多蛋白质甲基转移酶复合物调控的,部分由METTL酶调控。最近的研究发现,在哺乳动物中存在这些甲基化酶“写入者”及其相关的去甲基酶“擦除者”,揭示出 RNA m6A甲基化修饰是可逆的,如下图所示。 一个甲基通过METTL3 / 14异二聚体以化学方法加入到腺苷(A)残基的氮6位上,形成了N6-甲基腺苷(m6A)。 然后,m6A可以通过FTO介导的氧化脱甲基作用,逐步转化为N6-羟甲基腺苷(hm6A),随后转化为N6-甲酰腺苷(f6A),最后最终还原为原始腺苷酸(A)。
m6A修饰对RNA病毒生命周期的影响
病毒RNA修饰的研究工作流程有哪些呢?
首先,提取病毒RNA
病毒RAN快速提取试剂盒总RNA提取试剂盒(P-9107)
总RNA 快速提取试剂盒(P-9105)
M6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)(P-9005-48)
甲基化酶活性检测试剂盒(P-9019)
无论您是从细胞,组织还是病毒等样品开始实验,高效而快速的RNA提取通常都是成功进行实验的第一步。工作流程的这一部分至关重要,因为足够的纯度和产量都是确保下游应用程序平稳准确运行的基本要求。
而同时,在选择试剂盒的时候,要注意的是, 我们需要根据样本类型来挑选:
1)病毒样本:对于病毒样品,诸如低病毒滴度和高污染宿主核酸的存在等挑战要求使用补充技术来确保产量和纯度符合下游实验的要求。在我们最近的公告文章中,我们概述了完成此操作的10种方法,因此您可以将其应用到最适合您的学习的方法中。实现病毒扩增的常用方法是:接种病毒至宿主细胞,扩大培养宿主细胞进行病毒扩增,然后收集扩增的病毒体,搭配EpiGentek病毒RNA提取试剂盒提取病毒RNA。注意:对于直接从临床标本中提取的病毒RNA,在m6A RNA富集之前,需要去除宿主DNA和rRNA污染物。
2)细胞/组织样本:不需要特别处理;由于可以从细胞和组织样品中获取大量丰富的RNA,因此不需要太多额外的处理就可以获得足够下游应用的RNA样本。建议使用EpiGentek总RNA快速提取试剂盒或EpiQuik 磁珠法快速RNA提取试剂盒。
文章来源:每日生物评论
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