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细胞培养如何保证无菌操作(细胞培养的无菌技术实验)

细胞培养如何保证无菌操作(细胞培养的无菌技术实验)02 无菌技术操作视频文字记录 无菌技术可以防止细胞培养物和试剂受到环境中的微生物污染。本视频将概述在细胞培养超净台进行无菌操作所需的步骤。工作开始前,请确保已经洗手并穿戴了正确的个人防护设备,包括手套、实验服和防护镜。将消毒剂彻底喷洒在细胞培养超净台内,并用纸巾擦干净。将用过的纸巾扔在合适的垃圾箱里。将 70% 的乙醇喷洒在超净台内,并用纸巾擦干净。现在可以开始使用超净台了。从冰箱中取出细胞培养基和补充剂,放置于37℃ 的培养箱中使其升温。制备培养基时,用乙醇喷洒每一样物品,保证无菌。要迅速高效地操作,尽可能减少污染的风险,将所有试剂瓶放在便于取用的位置。向培养基瓶中加入不同补充剂时使用新的无菌吸头或移液管。仅在使用前打开培养基瓶,若取下瓶盖,请确保开口朝上。手或衣袖不要从打开的培养基瓶上方扫过,因为这可能导致污染。为尽量降低这种风险,用完培养基瓶后立刻盖上瓶盖。在培养基瓶上标记您的姓名

细胞培养的无菌技术实验

实验重点解析

01 无菌操作环境


  • 细胞培养应当在专门的细胞培养室内的层流安全柜中进行。
  • 安全柜或超净台在使用前后,用紫外 (UV) 灯对安全柜灭菌30分钟。
  • 实验前,应用 Trigene 消毒剂和 70% 乙醇对安全柜内部进行擦拭。
  • 实验操作时的实验服、手套和防护镜以及实验用具须经紫外照射消毒。
  • 工作区域应保持整洁,仅能放置当前实验程序所需的物品。

02 无菌技术操作


  • 在安全柜内开始工作前,戴上手套并喷洒 70% 乙醇。
  • 放入安全柜内的设备或试剂应预先喷洒 70% 乙醇。
  • 使用超净台时,应划分区域,拿取物品按照从左往右(或从右往左)的顺序,避免实验器械不必要的交叉或触碰。
  • 切忌倾倒细胞培养基或其他试剂。应当使用无菌玻璃移液管或一次性塑料移液管来操作液体,并且每只移液管仅使用一次。
  • 尽管许多细胞培养试剂经制造商认证为无菌,但仍有可能在处理过程中受到污染。如有需要应对无菌试剂进行过滤(0.22 µm 过滤器)或高压灭菌。
  • 切忌在不用时将试剂瓶、烧瓶或平皿在超净台内敞开放置。
  • 仅在使用前打开容器,并且如果需要将盖子放置在安全柜的表面上,确保开口朝上。尽快更换盖子。切忌同时打开多个烧瓶、平皿或瓶子,这可能会导致交叉污染。
  • 03 个人卫生习惯和防护措施

  • 操作细胞培养物前后务必彻底洗手。穿着实验服、手套和防护镜,以保护自己免受任何有害物质的伤害并防止细胞培养物受到存在于皮肤和衣服上的微生物污染。

细胞培养如何保证无菌操作(细胞培养的无菌技术实验)(1)

视频文字记录

细胞培养如何保证无菌操作(细胞培养的无菌技术实验)(2)

无菌技术可以防止细胞培养物和试剂受到环境中的微生物污染。本视频将概述在细胞培养超净台进行无菌操作所需的步骤。工作开始前,请确保已经洗手并穿戴了正确的个人防护设备,包括手套、实验服和防护镜。将消毒剂彻底喷洒在细胞培养超净台内,并用纸巾擦干净。将用过的纸巾扔在合适的垃圾箱里。将 70% 的乙醇喷洒在超净台内,并用纸巾擦干净。现在可以开始使用超净台了。从冰箱中取出细胞培养基和补充剂,放置于37℃ 的培养箱中使其升温。制备培养基时,用乙醇喷洒每一样物品,保证无菌。要迅速高效地操作,尽可能减少污染的风险,将所有试剂瓶放在便于取用的位置。向培养基瓶中加入不同补充剂时使用新的无菌吸头或移液管。仅在使用前打开培养基瓶,若取下瓶盖,请确保开口朝上。手或衣袖不要从打开的培养基瓶上方扫过,因为这可能导致污染。为尽量降低这种风险,用完培养基瓶后立刻盖上瓶盖。在培养基瓶上标记您的姓名缩写、日期以及内容物详情。

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