蛋白浓度计算方法（蛋白浓度计算）

蛋白浓度计算方法（蛋白浓度计算）选中蛋白标准品浓度列和减去背景值列为了使标准曲线过原点，接下来需要减去背景值，即每一个平均值都需要减去蛋白标准品浓度为0ug/ul所对应的吸光度平均值首先打开电脑，建立一个“蛋白浓度计算”Excel表格。打开表格，先输入蛋白标准品浓度（ug/ul），分别是0 0.025 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 然后将酶标仪获取的蛋白标准品吸光度值复制粘贴到表格中。接下来计算其平均值鼠标右键设置单元格格式，保留两位小数

大家好，我是科研实验汪。前面出过一期关于“蛋白浓度计算”的视频，根据大家需求，今天再给大家整理一份文字版本的供大家参考学习。

蛋白浓度的计算是Western Blot实验中比较重要的一步，蛋白浓度计算的准确，确保了蛋白上样的准确性，进而保证最终实验结果的准确。

蛋白浓度怎么算呢？接下来手把手教你:

用BCA蛋白浓度测定法在酶标仪上获得吸光度数据后，在电脑上进行下列操作

首先打开电脑，建立一个“蛋白浓度计算”Excel表格。打开表格，先输入蛋白标准品浓度（ug/ul），分别是0 0.025 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5

然后将酶标仪获取的蛋白标准品吸光度值复制粘贴到表格中。接下来计算其平均值

鼠标右键设置单元格格式，保留两位小数

为了使标准曲线过原点，接下来需要减去背景值，即每一个平均值都需要减去蛋白标准品浓度为0ug/ul所对应的吸光度平均值

选中蛋白标准品浓度列和减去背景值列

插入散点图

编辑插入的散点图，鼠标右键选择添加趋势线、显示公式、添加R值

标准曲线制作好后，输入待测样本的吸光度值，并计算其平均值

保留两位小数

然后带入标曲的y=kx b函数关系式中，蛋白样本平均值即为y值，求x值，即为96孔板中蛋白浓度

图为96孔板蛋白稀释20倍

同样的方法保留两位小数

因为测蛋白浓度（96孔板中）时，蛋白稀释了20倍，所以真正的蛋白浓度需要再乘于20

保留两位小数后即可

接下来计算蛋白上样量，以80ug蛋白上样量为例

再计算上样缓冲液的量，以4x上样buffer为例

最后得出蛋白上样量后就可以煮蛋白，进行后续操作。

小伙伴们，你学废了吗？欢迎点赞转发评论呀！还有什么想了解的实验技术，可以评论私信哦。