精索静脉曲张最新研究进展（精索静脉曲张实验研究进展）

精索静脉曲张最新研究进展（精索静脉曲张实验研究进展）术前大鼠需适应性饲养7天，手术组及假手术组动物术前及术后各禁食24小时。大鼠的青春期通常为(50±10)日，可选择鼠龄6-7周，体重170-220g的SD(张秋养等，2002)或Wistar雄性大鼠(Sahin et al，2005; Wang et al，2010)作为青春期大鼠。大鼠的饮食和生活环境应完全相同，并置于湿度和温度相对稳定的室内饲养环境中，生活环境要求12小时明/暗周期。◆如需行大鼠精液分析，可收集左侧附睾尾部精子。人类精索静脉曲张研究受伦理学等方面的影响，很难完成设计合理的随机、对照和双盲研究，而在获取人类精索静脉组织方面就更加困难。受年龄、职业、环境及个体差异等诸多因素的影响。因此精索静脉曲张动物模型在研究精索静脉曲张中显得非常重要。精索静脉曲张仅存在于直立行走的人类，而在其他哺乳类动物中并不存在。有研究显示，通过部分结扎左侧肾静脉建立左侧精索静脉曲张动物模型与人类精索

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本章要点

◆应用动物模型(如狗、兔子、大鼠等)进行精索静脉曲张病理生理研究已经有30余年的历史。动物模型中以大鼠最为常用。

◆精索静脉曲张大鼠造模中按0.8mm缩窄左肾静脉，观察术后7-11周，精索静脉曲张成模率较高。

◆如需行大鼠精液分析，可收集左侧附睾尾部精子。

人类精索静脉曲张研究受伦理学等方面的影响，很难完成设计合理的随机、对照和双盲研究，而在获取人类精索静脉组织方面就更加困难。受年龄、职业、环境及个体差异等诸多因素的影响。因此精索静脉曲张动物模型在研究精索静脉曲张中显得非常重要。

精索静脉曲张仅存在于直立行走的人类，而在其他哺乳类动物中并不存在。有研究显示，通过部分结扎左侧肾静脉建立左侧精索静脉曲张动物模型与人类精索静脉曲张比较，二者之间引流附睾及睾丸血液的静脉从精索静脉为主转变为骼血管为主，这种重新分布具有相似性(Turner et al，1994)。

一、实验大鼠的选择

大鼠的青春期通常为(50±10)日，可选择鼠龄6-7周，体重170-220g的SD(张秋养等，2002)或Wistar雄性大鼠(Sahin et al，2005; Wang et al，2010)作为青春期大鼠。大鼠的饮食和生活环境应完全相同，并置于湿度和温度相对稳定的室内饲养环境中，生活环境要求12小时明/暗周期。

术前大鼠需适应性饲养7天，手术组及假手术组动物术前及术后各禁食24小时。

二、精索静脉曲张造模手术

大鼠精索静脉走行与人类类似，左侧大部分汇聚为一支，与肾上腺静脉对侧呈直角汇人左肾静脉。故造模术中可以将肾上腺静脉作为寻找精索静脉汇入点的解剖标志。

1. Turner肾静脉缩窄术(Turner et al，2001)

左肾静脉缩窄术术后可能影响到的静脉回流，见图1-13-1。

大鼠以水合氯醛腹腔麻醉：大鼠腹腔注射10%的水合氯醛(1ml/300g)。麻醉成功后应用大鼠板固定，取大鼠剑突下腹部正中切口，逐层切开入腹，将腹内容物推向右上腹，于左侧腹膜后显露左肾静脉，游离部分左肾静脉后，在左肾上腺静脉与腹背静脉之间的左肾静脉段放置一直径0.85mm的金属杆，以4-0的丝线将金属杆与左肾静脉一并结扎，结扎完成后小心抽出金属杆，可见左肾静脉扩张迅速。观察2min，确定左肾无缺血后，逐层缝合切口(图1-13-2)。

文献显示实验性左侧精索静脉曲张造模术中肾静脉缩窄程度有以下几种：1mm (Saypol et al 1981) 0.85mm (Turner et al 2001) 0.8mm (Liang et al 2015; Zhang et al 2008; Chang et al 2010; Yu et al 2011; Tian et al 2014) 0.65mm(Kilin6 et al，2004; Zha et al，2011)。我们的精索静脉曲张动物造模中按0.8mm缩窄左肾静脉，观察术后7-11周精索静脉曲张成模率较高。

2.改良的精索静脉曲张造模手术(Yu et al，2011)

大鼠精索静脉与髂血管之间存在交通支，改良造模手术中除缩窄左肾静脉以外，还寻找左精索静脉与左髂总静脉之间的交通支，确定后仔细分离，用丝线结扎(图1-13-3)。用此种方法建立左精索静脉曲张的动物模型，成功率明显提高。

假手术组建模：显露左肾静脉后，只是于左肾静脉穿线打空结，而不缩窄左肾静脉。

三、术后取材时间的选择

造模术后取材时间的选择，争议较大。文献显示：术后4周、6周、8周、12周时间梯度中，术后4周即可出现精索静脉曲张，8周即可出现睾丸曲细精管的形态学的改变(Salama et al，2003;Sahin et al，2005; Tu et al，2012)。大鼠的生精周期相较人类的生精周期要短，我们选择大鼠的一个生精周期(7周)作为取材的时间点，观察到既有明显的精索静脉曲张，又能观察到附睾、睾丸形态学的变化。

精索静脉曲张模型建立成功的标志为：左精索静脉直径>1mm，双肾重量无明显差别，如图1-13-4所示。

造模术后取材时可选择腹腔麻醉后开腹取材。麻醉成功后取腹部正中切口，切开后显露腹膜后，分离粘连，观察双肾大小情况，测量精索静脉直径。如需留取血样，可以皮试针穿刺左肾静脉缩窄处远端取血。显露游离睾丸和附睾，可分别称重。病理标本的留取需以Bouin's液保存为宜。如需行大鼠精液分析，可收集左侧附睾尾部精子(Yuan et al，2010)：取材时快速切取左附睾，剪取附睾尾组织0.03-0.05g，置于添加2ml生理盐水的培养皿中(37℃预热Smin)，快速剪碎附睾尾组织后37℃恒温2min，摇匀，取悬浊液iOpi滴加到血细胞计数板上(37℃预热)。应用计算机辅助精液分析(CASA)或人工镜检行精子浓度及精子活动率(前向运动 非前向运动，progressive non-progressive，PR NP)的检测。

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