检测巨噬细胞极化的通路，我国学者揭示巨噬细胞M2极化新机制

检测巨噬细胞极化的通路，我国学者揭示巨噬细胞M2极化新机制原文链接：总之，该研究发现Stat6的Lys383在巨噬细胞激活期间被乙酰转移酶CREB结合蛋白（CBP）乙酰化，以抑制巨噬细胞M2极化。从机制上讲，与CBP相关的E3连接酶Trim24通过在Lys119上催化CBP泛素化来促进Stat6乙酰化，从而促进CBP募集到Stat6。Trim24的缺失会抑制Stat6乙酰化，从而促进小鼠和人类巨噬细胞中的M2极化，从而可能削弱抗肿瘤免疫反应。相比之下，Stat6介导M2巨噬细胞中TRIM24表达的抑制，从而有助于诱导免疫抑制肿瘤的生态位。综上所述，该发现将Stat6乙酰化确定为抑制巨噬细胞M2极化的基本负调控机制。为了研究Trim24调节的Stat6乙酰化的体内功能，研究人员生成了条件敲除（KO）小鼠，其中通过将Trim24小鼠与LysM cre小鼠杂交而在髓样细胞（以下称为Trim24M-/-）中特异性删除了Trim24。Trim24 缺失并不

已知Stat6驱动巨噬细胞M2极化。 但是，人们对如何通过Stat6微调巨噬细胞的极化知之甚少。

最近，上海交通大学医学院/中科院上海生科院秦骏与肖意传团队在Nature Communications上发表题为“Modulation of M2 macrophage polarization by the crosstalk betweenStat6 and Trim24”的文章，该研究发现Trim24缺陷会显着抑制Stat6乙酰化，从而促进M2极化并削弱巨噬细胞的抗肿瘤免疫功能。

巨噬细胞是一种功能多样的免疫细胞，广泛分布于整个成年哺乳动物的整个体内，以组织特异性和环境依赖性在调节稳态，炎症和抗肿瘤免疫中起着关键作用。这些细胞通常分为经典激活的（也称为M1）巨噬细胞，它们是由Th1细胞标志性细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）和/或受体（TLR）配体诱导的，以及通过刺激Th2标志性细胞因子白介素4（IL-4）或IL-13激活的活化巨噬细胞（也称为M2）。

在肿瘤中，浸润巨噬细胞（也称为肿瘤相关巨噬细胞（TAM））通常受环境因素的影响而呈现M2状态，对杀死肿瘤的免疫细胞的细胞毒性功能产生抑制作用，从而削弱了抗肿瘤免疫力，继而有助于免疫抑制肿瘤的生态位。巨噬细胞M2极化涉及酪氨酸磷酸化以及信号转导子和转录激活子6（Stat6）的激活，后者介导M2巨噬细胞特异性基因的转录激活。此外，已发表的研究表明，Stat6的基因缺失或药理抑制作用可显著抑制肿瘤生长，并促进巨噬细胞的抗肿瘤免疫应答。但是，人们对如何通过Stat6微调巨噬细胞的极化知之甚少。

为了研究Trim24调节的Stat6乙酰化的体内功能，研究人员生成了条件敲除（KO）小鼠，其中通过将Trim24小鼠与LysM cre小鼠杂交而在髓样细胞（以下称为Trim24M-/-）中特异性删除了Trim24。Trim24 缺失并不影响体内髓样细胞和淋巴样细胞的发育，成熟和激活。鼠原代巨噬细胞中的Trim24缺失显着抑制了Lys383处IL-4诱导的内源性CBP泛素化和Stat6乙酰化。此外，Stat6在IL-4刺激下在Trim24缺陷型巨噬细胞中被轻微乙酰化，这意味着在没有Trim24介导的CBP激活的情况下，其他乙酰基转移酶（例如p300）可能会冗余发挥作用来介导Stat6乙酰化。因此，如电泳迁移率变动分析（EMSA）所示，Trim24的缺失显着促进了Stat6的DNA结合活性。

为了进一步检查Stat6在基因组水平上的结合活性，研究人员从IL-4刺激的WT和Trim24缺陷型鼠原代巨噬细胞中免疫沉淀了Stat6，并通过深度测序（CHIP-Seq）分析了共免疫沉淀的DNA。如预期的那样，Trim24的丢失抑制了Stat6 K383乙酰化，增强了IL-4诱导的Stat6与M2基因启动子的结合。ChIP-QPCR结果进一步证实了这些数据，表明Trim24缺乏确实以时间依赖性方式促进了IL-4激活的Stat6结合活性。另外，在IL-4刺激下，与永生化的鼠巨噬细胞中的WTStat6相比，消除了Stat6乙酰化的Stat6中的K383R突变显着促进了Stat6与M2基因启动子的结合。这些结果表明，Stat6K383对于Stat6–DNA结合活性及其与M2基因启动子的结合至关重要。

Trim24缺乏增强M2基因启动子中Stat6的DNA结合活性

总之，该研究发现Stat6的Lys383在巨噬细胞激活期间被乙酰转移酶CREB结合蛋白（CBP）乙酰化，以抑制巨噬细胞M2极化。从机制上讲，与CBP相关的E3连接酶Trim24通过在Lys119上催化CBP泛素化来促进Stat6乙酰化，从而促进CBP募集到Stat6。Trim24的缺失会抑制Stat6乙酰化，从而促进小鼠和人类巨噬细胞中的M2极化，从而可能削弱抗肿瘤免疫反应。相比之下，Stat6介导M2巨噬细胞中TRIM24表达的抑制，从而有助于诱导免疫抑制肿瘤的生态位。综上所述，该发现将Stat6乙酰化确定为抑制巨噬细胞M2极化的基本负调控机制。

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https://www.nature.com/articles/s41467-019-12384-2