鲎试剂检测细菌内毒素标准操作（内毒素测定与鲎试验）

鲎试剂检测细菌内毒素标准操作（内毒素测定与鲎试验）【实验方法】 1.鲎试验试剂一套，待检测样品；2.大肠杆菌内毒素（阳性对照）、无菌蒸馏水、待检液等；3.吸管、小试管、试管架等。

【实验原理】

鲎试验是检测内毒素的一种试验方法，试验灵敏，能检出微量（0.0001μg/ml）内毒素。鲎是一种冷血动物，其血细胞的溶解产物与内毒素相遇即被凝固，机制尚不清楚，可能是溶解物中含有凝固蛋白原和一种高相对分子质量的凝固酶原，凝固酶原经内毒素激活转化成凝固酶，此酶使蛋白酶原变为凝固蛋白，再通过交联酶的作用，相互聚合形成纤维状凝胶。

【实验材料与仪器】

1.鲎试验试剂一套，待检测样品；

2.大肠杆菌内毒素（阳性对照）、无菌蒸馏水、待检液等；

3.吸管、小试管、试管架等。

【实验方法】

1.将鲎试剂按要求加入等量的不含有热原质的无菌蒸馏水，振摇2～3min使之溶解。

2.在试验管、阳性对照管及空白对照管中各加溶解物0.1ml。

3.试管中加待检液0.1ml，阳性对照管加大肠杆菌内毒素0.1ml，空白对照管加溶解水0.1ml，置37℃水浴1h后观察结果。

【实验结果】

1.阳性对照管出现凝固，空白对照管无变化时，试验结果正确，再观察待检测样品管。

2.试验管出现凝固为阳性，证明有内毒素存在，如未出现凝固，证明无内毒素存在。