双抗夹心elisa和普通的elisa区别：双抗夹心法ELISA检测原理

小君 2023-01-16 13:45:22 769

双抗夹心 ELISA 法是指将特异性针对待测抗原的抗体包被于 96 孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中待测抗原与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的针对待测抗原的抗体，形成夹心，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入 HRP 标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入 TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测抗原呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(O.D.值)，用于样本中待测抗原浓度测算。