地高辛对心肌自律细胞影响，香芹酚通过增强
地高辛对心肌自律细胞影响，香芹酚通过增强结论 动物及细胞实验均表明，香芹酚通过激活 PINK1/Parkin 通路增强自噬，从而减轻 MIRI。【关键词】 心肌再灌注损伤；心肌缺血再灌注损伤；香芹酚；自噬； PTEN 诱导激酶 1； Parkin 本文来源：闫莉，杨光，程功 . 香芹酚通过增强 PTEN 诱导激酶 1/Parkin 介导的自噬而减轻心肌缺血再灌注损伤的动物及细胞实验［ J］ . 实用心脑肺血管病杂志， 2021， 29（ 11）： 69-78.YAN L， YANG G， CHENG G. Carvacrol reduces myocardial ischemia-reperfusion injury by activating PTEN induced putative kinase 1/Parkin-mediated autophagy： animal and cell experiments［ J］ .
闫莉，杨光，程功
【摘要】 背景 在心血管疾病中， PTEN 诱导激酶 1（ PINK1） /Parkin 介导的自噬通过有效地清除受损的线粒体和过量的活性氧（ ROS）来维持细胞内线粒体的动态平衡。香芹酚具有减少心肌细胞中 ROS 生成和降低线粒体损伤的作用。然而，目前尚不清楚香芹酚对心肌缺血再灌注损伤（ MIRI）中自噬的影响。
目的 通过动物及细胞实验探讨香芹酚对 MIRI 的治疗作用及其机制。
方法 本研究时间为 2020 年 5 月至 2021 年 5 月。动物实验：将成年雄性Sprague-Dawley 大鼠随机分为 Sham 组（ A 组）、 MIRI 组（ B 组）、 MIRI 20 mg/kg 香芹酚组（ C 组）和 MIRI 60 mg/kg香芹酚组（ D 组），每组 12 只。 B、 C、 D 组大鼠建立 MIRI 模型， A 组大鼠接受相同的手术，但不结扎冠状动脉左前降支；术前 15 min， C 组和 D 组大鼠腹腔注射相应剂量的香芹酚， A 组和 B 组大鼠给予等体积的 0.9% 氯化钠溶液。检测 A、 B、C、 D 组大鼠血清心肌肌钙蛋白 I（ cTnI）、肌酸激酶同工酶（ CK-MB）、天冬氨酸氨基转移酶（ AST）、乳酸脱氢酶（ LDH）水平，心肌梗死面积，心肌病变情况，心肌组织中 PINK1、 Parkin、 Beclin1 蛋白表达水平及微管相关蛋白轻链 3（ LC3） - Ⅱ /LC3- Ⅰ。细胞实验：将 H9C2 细胞分为对照组（ E 组）、缺氧 / 复氧（ H/R）组（ F 组，进行 H/R 处理）、 H/R 香芹酚组（ G 组，用 100 μ mol/L 香芹酚预处理 6 h 后进行 H/R 处理）、 H/R 香芹酚 阴性对照小干扰RNA（ NC-siRNA）组（ H 组，转染 NC-siRNA 后用 100 μ mol/L 香芹酚预处理 6 h，然后进行 H/R 处理）和 H/R 香芹酚 靶向 PINK1 的小干扰 RNA（ PINK1-siRNA）组（ I 组，转染 PINK1-siRNA 后用 100 μ mol/L 香芹酚预处理 6 h，然后进行 H/R 处理）。检测 E、 F、 G、 H、 I 组细胞活力、细胞凋亡率， H9C2 细胞中 PINK1、 Parkin、 Beclin1 蛋白表达水平及 LC3- Ⅱ /LC3- Ⅰ 。
结果 动物实验： B、 C、 D 组大鼠血清 cTnI、 CK-MB、 AST、 LDH 水平高于 A 组（ P ＜ 0.05）； C、D 组大鼠血清 cTnI、 CK-MB、 AST、 LDH 水平低于 B 组（ P ＜ 0.05）； D 组大鼠血清 cTnI、 CK-MB、 AST、 LDH 水平低于 C 组（ P ＜ 0.05）。 A 组大鼠心肌梗死面积为 0。 C、 D 组大鼠心肌梗死面积小于 B 组（ P ＜ 0.05）； D 组大鼠心肌梗死面积小于 C 组（ P ＜ 0.05）。 HE 染色结果显示， A 组大鼠心肌细胞排列整齐，细胞核明显，无炎性细胞浸润；B 组大鼠心肌组织广泛坏死，心肌纤维排列紊乱，大量炎性细胞浸润； C、 D 组大鼠心肌细胞排列较整齐，细胞坏死程度和范围明显减轻。 Masson 三色染色结果显示， A 组大鼠心肌组织以心肌细胞为主，没有明显的胶原成分； B 组大鼠心肌组织心肌纤维化明显，仅有少量心肌细胞存在； C、 D 组大鼠心肌组织的胶原纤维含量明显减少。定量分析结果显示，B、 C、 D 组大鼠心肌纤维化百分比高于 A 组（ P ＜ 0.05）； C、 D 组大鼠心肌纤维化百分比低于 B 组（ P ＜ 0.05）；D 组大鼠心肌纤维化百分比低于 C 组（ P ＜ 0.05）。 TUNEL 染色结果显示， B、 C、 D 组大鼠心肌组织 TUNEL 阳性率高于 A 组（ P ＜ 0.05）； C、 D 组大鼠心肌组织 TUNEL 阳性率低于 B 组（ P ＜ 0.05）； D 组大鼠心肌组织 TUNEL 阳性率低于 C 组（ P ＜ 0.05）。 B、 C、 D 组大鼠心肌组织中 PINK1、 Beclin1 蛋白表达水平低于 A 组， B、 C 组大鼠心肌组织中 Parkin 蛋白表达水平低于 A 组， B 组大鼠心肌组织中 LC3- Ⅱ /LC3- Ⅰ低于 A 组， C、 D 组大鼠心肌组织中LC3- Ⅱ /LC3- Ⅰ高于 A 组（ P ＜ 0.05）； C、 D 组大鼠心肌组织中 PINK1、 Parkin、 Beclin1 蛋白表达水平及 LC3- Ⅱ/LC3- Ⅰ高于 B 组（ P ＜ 0.05）； D 组大鼠心肌组织中 Parkin、 Beclin1 蛋白表达水平高于 C 组，（ P ＜ 0.05）。细胞实验： F、G、 H、 I 组细胞活力小于 E 组（ P ＜ 0.05）； G、 H 组细胞活力大于 F 组（ P ＜ 0.05）； I 组细胞活力小于 G、 H 组（ P ＜ 0.05）。 F、 G、 H、 I 组细胞凋亡率高于 E 组（ P ＜ 0.05）； G、 H、 I 组细胞凋亡率低于 F 组（ P ＜ 0.05）；I 组 细 胞 凋 亡 率 高 于 G、 H 组（ P ＜ 0.05）。 F 组 H9C2 细 胞 中 PINK1、 Parkin、 Beclin1 蛋 白 表 达 水 平 及 LC3- Ⅱ/LC3- Ⅰ低于 E 组（ P ＜ 0.05）； G、 H 组 H9C2 细胞中 PINK1、 Beclin1 蛋白表达水平低于 E 组、高于 F 组， Parkin蛋白表达水平高于 F 组， LC3- Ⅱ /LC3- Ⅰ高于 E、 F 组（ P ＜ 0.05）； I 组 H9C2 细胞中 PINK1、 Parkin、 Beclin1 蛋白表达水平及 LC3- Ⅱ /LC3- Ⅰ低于 E、 G、 H 组， Beclin1 蛋白表达水平高于 F 组（ P ＜ 0.05） 。
结论 动物及细胞实验均表明，香芹酚通过激活 PINK1/Parkin 通路增强自噬，从而减轻 MIRI。
【关键词】 心肌再灌注损伤；心肌缺血再灌注损伤；香芹酚；自噬； PTEN 诱导激酶 1； Parkin
本文来源：闫莉，杨光，程功 . 香芹酚通过增强 PTEN 诱导激酶 1/Parkin 介导的自噬而减轻心肌缺血再灌注损伤的动物及细胞实验［ J］ . 实用心脑肺血管病杂志， 2021， 29（ 11）： 69-78.
YAN L， YANG G， CHENG G. Carvacrol reduces myocardial ischemia-reperfusion injury by activating PTEN induced putative kinase 1/Parkin-mediated autophagy： animal and cell experiments［ J］ . Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease， 2021， 29（ 11）： 69-78.
原文如下：
