简述荧光定量pcr与普通pcr的区别(5分钟带你了解普通PCR与荧光定量PCR的不同之处)
简述荧光定量pcr与普通pcr的区别(5分钟带你了解普通PCR与荧光定量PCR的不同之处)经过了解,各位读者对两种PCR方法是不是都有了大致的了解呢?大家可以通过自己检测目的不同选择更合适的检测方式。4. 普通PCR的仪器价格和检测成本都要远低于荧光定量PCR仪。1. 二者原理不同,上面已经详细讲过,在此小编不做赘述。2. 荧光定量PCR适用于长度大概在100-300bp的目的片段,而普通PCR更适用于300bp以上的目的片段。3. 普通PCR只适用定性分析,即“有没有”的问题,而荧光定量PCR 不仅可以定性分析,还可以定量分析,即“多和少”的问题。
自上个世纪PCR技术(聚合酶链反应,polymerase chain reaction)出现,经过科学家们几十年的研究与推广,PCR技术如今已经成为了生物科学领域的重要研究手段,直至现在已发展出了快速PCR、巢式PCR、多重PCR等众多PCR方法。要说应用最为广泛的PCR方法,那就不得不提普通PCR技术和荧光定量PCR技术,下面小编就带你来看看这两种技术的特点与不同吧!
普通PCR又称终点PCR,是最传统与基础的PCR方法,这种方法通过在产物正常扩增结束后,进行琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺电泳等方式对产物染色、拍照,通过得到的条带亮度对PCR产物的量、片段长度进行分析。但是我们要注意很重要的一点,普通PCR不能反映反应体系的起始状态,即样品差异、扩增效率差异等多种情况都可能会导致最终的扩增效果,所以这种方法比较适用于疾病诊断与某些定性研究分析。
荧光定量PCR即qPCR、Real-time PCR,都是实时定量PCR。其原理就是在PCR反应体系中加入特定的探针,其中含有荧光基团,荧光定量PCR仪在每一个扩增循环都会收集积累的荧光信号,从而达到对反应体系的全程监控与定量分析,所以qPCR既可以反映反应体系的起始状态,也可以反映最终扩增效果,相比于普通PCR更精确,更简单。
二者的不同主要集中在以下几个方面:
1. 二者原理不同,上面已经详细讲过,在此小编不做赘述。
2. 荧光定量PCR适用于长度大概在100-300bp的目的片段,而普通PCR更适用于300bp以上的目的片段。
3. 普通PCR只适用定性分析,即“有没有”的问题,而荧光定量PCR 不仅可以定性分析,还可以定量分析,即“多和少”的问题。
4. 普通PCR的仪器价格和检测成本都要远低于荧光定量PCR仪。
经过了解,各位读者对两种PCR方法是不是都有了大致的了解呢?大家可以通过自己检测目的不同选择更合适的检测方式。