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细胞克隆化的方法:悬浮细胞克隆的分离

细胞克隆化的方法:悬浮细胞克隆的分离步骤生长培养基多孔板培养瓶解剖显微镜移液器粗头笔黄色枪头原理用加样枪或Pasteur吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。材料与仪器

简介

用加样枪或Pasteur吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

操作方法

悬浮细胞克隆的分离

原理

用加样枪或Pasteur吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

材料与仪器

生长培养基多孔板培养瓶解剖显微镜移液器粗头笔黄色枪头

步骤

1. 用倒置显微镜观察培养皿中的细胞,用毡制粗头笔或Nikon标记笔标记出集落。 2.24孔板的每一孔中加1 ml培养基。 3.解剖显微镜(20~50×放大)下挑取集落 (a)每一个细胞集落用一个枪头(加样枪上的黄色枪头)。 (b)将移液器调至100μl。 (c)先用枪头吸大约50μl的培养基,将该枪头对准要分离的集落,在集落内轻轻吸取剩余的50μl。 4.将吸取物移至24孔板,用培养基冲洗集落,如果培养基中含美希索,集落就会固定、黏附,然后生长;如果培养基含有琼脂,则需用吸管在培养孔内上下吹吸集落几次,分散琼脂。细胞克隆也可以直接移至竖直放置的25 cm2的塑料培养瓶中。

细胞克隆化的方法:悬浮细胞克隆的分离(1)

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