细胞质量检测的步骤（如何用计数法测定细胞工厂中细胞的生长状况）

细胞质量检测的步骤（如何用计数法测定细胞工厂中细胞的生长状况）4. 使用后，用超纯水和75%乙醇清洗干净；3.用 100倍显微镜下观察情况，计算中央方格和四个角落的方格中的细胞数量。原则是计左不计右，计上不计下，也就是说，计算压在左边中线和上边中线的细胞，但是不计算右边中线和下边中线的细胞；1.准备适合该中细胞消化浓度的胰蛋白酶消化液，吸出培养基，加入消化液，在孵箱中消化适宜的时间，待细胞变圆后加入等量或大于消化液体积的培养基终止消化。离心后，用培养基制成细胞悬液；2层细胞工厂2. 将盖玻片放置在血细胞计数板中间处，用10ul小枪头或者毛细吸管吸取少量的细胞悬液，然后将细胞悬液缓慢注入盖玻片和计数板的接触边缘，虹吸作用会让细胞悬液缓慢进入小室，充满间隙；

在利用细胞工厂进行细胞培养时，经常会涉及到对细胞活力和增殖情况的测定，在诸多测定方法中，细胞计数法是常用的一种。

细胞培养耗材

细胞计数法是利用血细胞计数板计量细胞悬液中细胞数量，从而推算细胞的增殖和铺板密度的方法，简单易操作，但是耗材时间较长，所需细胞量比较多。同时，由于是人工操作，这种计数方法存在一定的误差。对细胞工厂中的细胞计数，可以按照以下步骤操作：

10层细胞工厂

1.准备适合该中细胞消化浓度的胰蛋白酶消化液，吸出培养基，加入消化液，在孵箱中消化适宜的时间，待细胞变圆后加入等量或大于消化液体积的培养基终止消化。离心后，用培养基制成细胞悬液；

2层细胞工厂

2. 将盖玻片放置在血细胞计数板中间处，用10ul小枪头或者毛细吸管吸取少量的细胞悬液，然后将细胞悬液缓慢注入盖玻片和计数板的接触边缘，虹吸作用会让细胞悬液缓慢进入小室，充满间隙；

3.用 100倍显微镜下观察情况，计算中央方格和四个角落的方格中的细胞数量。原则是计左不计右，计上不计下，也就是说，计算压在左边中线和上边中线的细胞，但是不计算右边中线和下边中线的细胞；

4. 使用后，用超纯水和75%乙醇清洗干净；

5. 细胞密度=平均细胞数*104*稀释倍数（个/ml）；

6. 细胞总数=细胞密度*细胞悬液体积（个）。

测定细胞工厂中的细胞生长状况可以按照以上步骤操作，需要注意的是，如果显微镜下有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，如果细胞团过多，超过10%，则说明分散情况不好，需要重新制备细胞悬液进行测定。