高效液相色谱仪的基本操作方法（快速液相色谱仪SepaBean）

高效液相色谱仪的基本操作方法（快速液相色谱仪SepaBean）点击原文链接https://www.chembeango.com/zixun/24238看完整内容，了解更多新鲜资讯，搜ChemBeanGo！ 图3. 在SepaBean APP 相应的页面输入样品的 HPLC 分析结果 因该样品极性较弱，不适合在正相模式下进行分离纯化，因此考虑采用反相分离模式。首先取少量样品进行HPLC分析，HPLC分析图谱如图2所示。 图2. 样品的HPLC分析图谱 根据样品的HPLC分析结果，三泰科技的应用工程师开始尝试对1.5g的样品进行Flash制备纯化。首先将样品的HPLC分析结果依次填入SepaBean控制APP中对应的位置，主要包括所用洗脱溶剂体系、目标产物及主要杂质的保留时间和对应洗脱峰的峰面积百分比、出峰时洗脱溶剂B的百分比等关键信息（如图3所示），完成输入后点击APP界面的“下一步”按钮，在接下来的设置页面填入上样量、检测波长等实验参数，SepaBe

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在之前的介绍SepaBean APP新功能的应用文章里，我们给大家介绍了正相分离中的洗脱梯度推荐功能，根据上样量以及样品的TLC点板信息自动推荐最适合的Flash分离柱，并能自动生成经过优化的洗脱梯度条件，从而使实验流程大大简化，提高了广大研究人员的工作效率。然而，对于极性较弱的化合物而言，正相分离模式就不适用了，一般采用反相分离模式，这种情况下有没有类似于正相模式下的分离方法自动推荐功能可以利用呢？没问题！三泰科技的研发人员早就考虑到了这一点，已开发出了可以满足用户需求的APP功能，今天就以某药物中间体的合成产物分离纯化为例进行简单介绍。

本文中的样品为某药物中间体的合成产物，其最后一步反应式如图1所示。

图1. 某药物中间体的最后一步合成反应式

因该样品极性较弱，不适合在正相模式下进行分离纯化，因此考虑采用反相分离模式。首先取少量样品进行HPLC分析，HPLC分析图谱如图2所示。

图2. 样品的HPLC分析图谱

根据样品的HPLC分析结果，三泰科技的应用工程师开始尝试对1.5g的样品进行Flash制备纯化。首先将样品的HPLC分析结果依次填入SepaBean控制APP中对应的位置，主要包括所用洗脱溶剂体系、目标产物及主要杂质的保留时间和对应洗脱峰的峰面积百分比、出峰时洗脱溶剂B的百分比等关键信息（如图3所示），完成输入后点击APP界面的“下一步”按钮，在接下来的设置页面填入上样量、检测波长等实验参数，SepaBean APP即可自动生成推荐的Flash分离柱、合适的流速以及自动优化后的洗脱梯度（如图4所示），实验人员几乎不需要做任何改动即可直接进入下一步的分离步骤。表1所示为本次制备纯化实验的参数设置。

图3. 在SepaBean APP 相应的页面输入样品的 HPLC 分析结果

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