如何有效诊断肺结核（诊断肺结核有了）

如何有效诊断肺结核（诊断肺结核有了）1996年Mahairas等研究发现在致病性结核分枝杆菌中存在一段特殊的基因序列，即“RD1”基因序列，该基因序列在所有卡介苗菌株和大部分非结核分枝杆菌中表达缺失。RD1基因序列编码两种蛋白：早期分泌抗原靶6KD（ESAT-6）和培养滤液蛋白10KD（CFP-10）。人体感染结核分枝杆菌后，这两种蛋白作为抗原能够刺激机体细胞免疫，产生特异性效应T淋巴细胞，这种细胞具有“记忆功能”，当再次受到结核分枝杆菌刺激时会释放特异性细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）。T-SPOT.TB是如何检测到结核菌的？什么是T-SPOT.TB？结核感染特异性T细胞实验（T cell spot test of tuberculosis infection T-SPOT.TB）是利用酶联免疫斑点法检测结核感染者体内的特异性效应T淋巴细胞来诊断结核病的一种新的实验技术。结核感染特异性T细胞实验的临床应用领域

T-SPOT.TB 检测能利用结核特异抗原ESAT-6及CFP-10检测出受试者体内存在的结核效应T淋巴细胞，从而判断该受试者是否感染结核杆菌（现症感染）。那么，检测结核杆菌，它真的是万能的吗？

作者：南方医科大学珠江医院 单雄威

来源：医学界呼吸频道

近年来我国结核病发病呈现不典型和多重耐药的特点。T-SPOT.TB因其检测快速、敏感性和特异性高广泛应用于临床结核病的诊治过程中。那么，是否在结核病的诊断过程中，T-SPOT.TB是万能的呢？

什么是T-SPOT.TB？

结核感染特异性T细胞实验（T cell spot test of tuberculosis infection T-SPOT.TB）是利用酶联免疫斑点法检测结核感染者体内的特异性效应T淋巴细胞来诊断结核病的一种新的实验技术。

结核感染特异性T细胞实验的临床应用领域

T-SPOT.TB是如何检测到结核菌的？

1996年Mahairas等研究发现在致病性结核分枝杆菌中存在一段特殊的基因序列，即“RD1”基因序列，该基因序列在所有卡介苗菌株和大部分非结核分枝杆菌中表达缺失。RD1基因序列编码两种蛋白：早期分泌抗原靶6KD（ESAT-6）和培养滤液蛋白10KD（CFP-10）。人体感染结核分枝杆菌后，这两种蛋白作为抗原能够刺激机体细胞免疫，产生特异性效应T淋巴细胞，这种细胞具有“记忆功能”，当再次受到结核分枝杆菌刺激时会释放特异性细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）。

基于此原理，英国学者Lalvani采用酶联免疫斑点实验技术（ELISPOT）以结核特异性抗原ESAT-6和CFP-10肽段库作为刺激原，检测外周血单个核细胞（PBMC）IFN-γ的分泌，并经酶联免疫显色，通过ELISPOT分析系统对斑点数进行分析检测结核分枝杆菌，即T-SPOT.TB。

T-SPOT.TB实验结果判定标准是什么？

T-SPOT.TB结果阳性是否就能确诊结核菌感染？

不能，阳性结果表明患者体内存在结核特异性T淋巴细胞，提示患者存在结核菌感染。若出现以下情况将不能排除假阳性结果可能。

①堪萨斯、苏式、戈登或海分枝杆菌感染可出现假阳性结果（注：这些分枝杆菌可使HIV患者发生机会感染）。

②结核菌素实验（TST）亦能造成假阳性结果，故需在TST实验前或试验后3天内抽取血标本。

此外，阴性结果不能完全排除暴露或感染结核菌的可能性，仅表明患者体内未检测到结核特异性T淋巴细胞，若出现以下情况，将不能排除结核菌感染可能。

①因感染阶段不同（如检测标本在细胞免疫发生之前取得）引起的假阴性结果；

②患者存在免疫系统功能不全的情况，如HIV感染者、肿瘤患者及婴幼儿等；

③其它免疫学、实验非正常操作的差异。

总结：

1）研究显示T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有诊断快速、较高的敏感性和特异性，但T-SPOT.TB阳性结果不能作为结核病单独或决定性诊断依据，且无法鉴别潜伏感染和活动性结核病。此外，阴性结果不能完全排除暴露或感染结核菌的可能性，且这种检测的费用较高。T-SPOT.TB不能取代痰涂片在确证结核病的方面的重要作用。

2）T-SPOT.TB技术可以检测静脉血、痰液、支气管肺泡灌洗液、胸腹水和脑脊液等，对肺结核及肺外结核诊断有一定的诊断价值。同时对结核患者抗结核治疗的疗效评估具一定的临床意义。

参考文献：

[1]陈灏珠，林果为，王吉耀，何礼贤，等. 《实用内科学》: 第14版[M]. 人民卫生出版社 2013.

[2]Lalvani A. Spotting latent infection:the path to better tuberculosis control[J].Thorax 2003 58:916-918.

[3]Cho OH Park KH Park SJ et al. Rapid diagnosis of tuberculous peritonitis by T cell-based assays on peripheral blood and peritoneal fluid mononuclear cells[J].J Infect 2011 62(6):462-471..

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