口腔拭子基因组dna提取结果分析（一株永生化口腔癌相关成纤维细胞系的建立及鉴定）

口腔拭子基因组dna提取结果分析（一株永生化口腔癌相关成纤维细胞系的建立及鉴定）关键词: 肿瘤相关成纤维细胞 口腔鳞癌 原代细胞 永生化细胞系 细胞衰老 染色体核型鉴定中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程方法：采用酶消化法分离、纯化人口腔癌组织来源肿瘤相关成纤维细胞，利用包装有人端粒酶反转录酶(pBABE-hygro-hTERT)的慢病毒感染原代肿瘤相关成纤维细胞，鉴定其形态及其标志物，然后进行细胞增殖、衰老功能检测，对原代和永生化肿瘤相关成纤维细胞进行染色体核型分析、细胞系身份鉴定。结果与结论：①成纤维细胞永生化后，其标志物α-SMA、PDGFRβ以及FSP-1表达没有发现显著改变；②即使在传代15代后，永生化成纤维细胞的增殖速率明显优于非永生化成纤维细胞；③β-半乳糖苷酶染色结果显示：随着细胞代数增加，与非永生化成纤维细胞相比，永生化成纤维细

摘要：

文题释义：

肿瘤相关成纤维细胞：是肿瘤基质细胞的主要成分，又称肌纤维母细胞、癌旁成纤维细胞、反应性纤维母细胞、癌相关成纤维细胞。相较于长梭形的静息状态成纤维细胞，肿瘤相关成纤维细胞体积较大、排列方式杂乱、呈纺锤形、细胞核呈锯齿状、细胞浆中收缩细丝或张力纤维丝增加，可通过自分泌或旁分泌细胞因子的形式作用于肿瘤细胞，或通过与肿瘤细胞直接接触，参与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移等重要病理过程。

背景：肿瘤相关成纤维细胞系是构成肿瘤微环境的重要细胞成分，但是在原代培养过程中极易老化和表型丢失，进而显著降低肿瘤相关成纤维细胞功能相关研究的实验重复性。

目的：旨在建立一种永生化的口腔癌相关成纤维细胞系，为探索口腔癌中肿瘤相关成纤维细胞功能提供稳定的细胞实验材料。

方法：采用酶消化法分离、纯化人口腔癌组织来源肿瘤相关成纤维细胞，利用包装有人端粒酶反转录酶(pBABE-hygro-hTERT)的慢病毒感染原代肿瘤相关成纤维细胞，鉴定其形态及其标志物，然后进行细胞增殖、衰老功能检测，对原代和永生化肿瘤相关成纤维细胞进行染色体核型分析、细胞系身份鉴定。

结果与结论：①成纤维细胞永生化后，其标志物α-SMA、PDGFRβ以及FSP-1表达没有发现显著改变；②即使在传代15代后，永生化成纤维细胞的增殖速率明显优于非永生化成纤维细胞；③β-半乳糖苷酶染色结果显示：随着细胞代数增加，与非永生化成纤维细胞相比，永生化成纤维细胞未见明显衰老；④永生化成纤维细胞染色体核型仍保留正常细胞的基本特征，而未发生恶性转化；⑤短串联重复序列鉴定结果显示，永生化成纤维细胞为原代细胞，与已知细胞数据库信息均无重合；⑥以上结果说明，成功建立了口腔癌来源的永生化成纤维细胞系，为口腔癌肿瘤微环境研究提供进一步的实验基础。

https://orcid.org/0000-0003-2120-4443 (陈盛)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 肿瘤相关成纤维细胞 口腔鳞癌 原代细胞 永生化细胞系 细胞衰老 染色体核型鉴定

引用本文: 陈 盛 杨 艳 丁 亮 叶传进 张 磊 夏 舒 李慧玲 黄晓峰. 一株永生化口腔癌相关成纤维细胞系的建立及鉴定[J]. 中国组织工程研究 2022 26(24): 3808-3813.

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